제품/서비스

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  • [SUG] Solg™ E. coli Uracil-DNA Glycosylase 공기 중 DNA 오염으로 인한 위양성 문제해결

    SolGent™ E. coli Uracil-DNA Glycosylase (UDG)는 uracil을 포함한 DNA의 deoxyribose sugar와 uracil 염기 사이의 N-glycosylic 결합을 가수분해하여 uracil을 제거하는 효소로, cross contamination이나 carry-over contamination을 방지하기 위한 방법 중 하나입니다. UDG를 적용한 PCR 반응에는 dTTP 대신 dUTP를 사용합니다. 단, proofreading 기능을 갖는 DNA polymerase (B-family DNA polymerase ; Pfu 계열) 및 PCR enhancing factor로 dUTPase가 혼합된 제품과 함께 사용할 수 없습니다. 또한 uracil을 포함한 single strand DNA와 double strand DNA는 가수분해하지만, RNA에는 작용하지 않습니다.

제품사양
제품사양
Source E. coli (K-12 strain)
(Recombinant)
Reaction temp. & time 50 ℃ for 3 min
Inactivation 95 ℃ for 5 min
제품응용

Removing of uracil-containing DNA , Elimination carry-over contamination in PCR, PCR diagnosis, Site-directed mutagenesis

실험데이터
UDG 활성 테스트 (타사제품과 비교) pro_1_4_2_0101.jpg
반응 온도에 따른 UDG 활성 테스트 pro_1_4_2_0102.jpg
인용&논문
  1. Choi JJ, Kim CH,

    et al., Peptide Nucleic Acid-Based Array for Detecting and Genotyping Human Papillomaviruses, Journal of Clinical Microbiology, 47 : 1785-1790, 2009

실험과정예시
pro_1_4_2_0103.jpg

주로 동일한 실험을 반복하거나 PCR을 이용한 임상진단과 같이 다량의 검체를 이용하여 PCR을 수행할 경우, 이전에 사용하였던 시료 (PCR product) 의 공기 중 오염으로 위양성을 초래할 수 있습니다. UDG system은 이러한 문제를 해결하기 위한 방법 중 하나로 cross contamination이나 carryover contamination에 의한 위양성을 최소화 할 수 있습니다. UDG System에서는 PCR에 사용되는 dNTP mixture 중 dTTP 대신 dUTP를 사용하여 PCR을 수행합니다. 이때 증폭된 PCR product는“T”염기 대신“U”염기가 삽입됩니다 (dU-DNA) (STEP 1). 이후 다음 PCR 수행 전, PCR mixture에 UDG를 처리 한 후 PCR을 수행합니다. 만약 이전의 PCR product (dU-DNA)에 의해 검체가 오염되어 있다면, UDG에 의해 이전 PCR product 내 Uracil 염기의 N-glycosylic 결합이 가수분해되어 오염된 DNA는 제거됩니다 (STEP 2).

제품형태 (Format)
제품사진 구성품목 보관온도 & 유통기한
E. coli Uracil-DNA Glycosylase (1 U/㎕) -20 ℃ 보관 시 2년 3개월
주문정보 (Ordering information) (VAT 별도)
Cat. No. Product Size Price(won)
SUG21-R10h SolGent™ E. coli Uracil-DNA Glycosylase 1,000 U
(1,000 reaction)
150,000
Manual SUG21-R10h_SolGent™_Uracil-DNA_Glycosylase_개정일_20180622